Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD53 (m): sc-419561
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD53 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD53, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD53 Antibody (B-12): sc-390185
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD53 (m) | sc-419561 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cd53 code pour CD53, une glycoprotéine de surface cellulaire de la famille des tétraspanines, enrichie dans les leucocytes, qui contribue à organiser des microdomaines membranaires et à coordonner la signalisation des récepteurs. CD53 participe à l’adhésion, à la migration et à l’activation des cellules immunitaires en modulant la fonction des intégrines et en s’associant à des complexes de signalisation qui influencent le remodelage du cytosquelette et les voies des kinases en aval. Dans des modèles murins, les profils d’expression et la fonction de CD53 sont étroitement liés aux réponses des lymphocytes B et T, à la présentation de l’antigène et aux réseaux de signalisation inflammatoire. Une organisation dérégulée des tétraspanines, notamment via des interactions dépendantes de CD53 altérées, est fréquemment étudiée dans des contextes de dysfonctionnement immunitaire et de biologie des cellules hématopoïétiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD53 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd53 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd53, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd53 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD53.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd53 pour l'étude de la signalisation de CD53, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cd53 essentiels à la fonction de CD53
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd53 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD53 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD53 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd53. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD53 plasmide HDR (m) et le CD53 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd53 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd53 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.