Plasmide Double Nickase (h) CD52: sc-403151-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD52 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD52 Double Nickase (h) et le plasmide CD52 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD52. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD52 Antibody (HI186): sc-51560
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD52 | sc-403151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD52 | sc-403151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD52 code une petite glycoprotéine de surface cellulaire ancrée au glycosylphosphatidylinositol (GPI), largement exprimée sur les lymphocytes et d’autres sous-populations de leucocytes. Elle contribue à la biologie des cellules immunitaires en influençant l’organisation de la membrane et les microdomaines de signalisation, avec des effets en aval sur l’état d’activation, l’adhésion et l’homéostasie immunitaire. L’expression de CD52 est couramment utilisée comme marqueur pour l’immunophénotypage et pour analyser la composition des lignages ainsi que les états fonctionnels au sein des compartiments hématopoïétiques. Des populations de cellules CD52-positives dérégulées sont fréquemment étudiées dans le contexte de l’inflammation à médiation immunitaire et de la recherche sur les hémopathies malignes, où les variations d’abondance des cellules immunitaires et la dynamique de signalisation constituent des caractéristiques centrales.
CD52 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD52 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD52. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD52. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD52.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.