Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) CD42d: sc-404793-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD42d correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD42d Double Nickase (h) et le plasmide CD42d Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GP5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD42d Antibody (G-11): sc-271662
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD42d | sc-404793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD42d | sc-404793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP5 code la glycoprotéine plaquettaire V (CD42d), un composant du complexe récepteur GPIb‑IX‑V à la surface des plaquettes, qui coopère avec la liaison au facteur von Willebrand pour assurer l’accrochage des plaquettes en conditions de fort cisaillement et qui soutient l’activation plaquettaire dépendante de la thrombine. Par ces interactions, CD42d contribue à l’adhésion hémostatique, à la mécanotransduction et aux événements de signalisation en aval qui coordonnent la libération des granules plaquettaires et l’activation des intégrines. Une expression ou une fonction altérée du complexe GPIb‑IX‑V est associée à des défauts héréditaires d’adhésion plaquettaire et peut influencer les phénotypes thrombotiques et hémorragiques, faisant de GP5 un locus utile pour étudier la biologie plaquettaire et les processus inflammatoires liés à la coagulation.
CD42d Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GP5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GP5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GP5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GP5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.