Plasmide Double Nickase (h) CD38: sc-401117-NIC

Le CD38 humain code une ectoenzyme et un récepteur multifonctionnels qui régulent le métabolisme du NAD⁺ en catalysant la formation et l’hydrolyse de l’ADP-ribose cyclique et de métabolites apparentés, modulant ainsi la mobilisation intracellulaire du Ca²⁺. Par ces activités, CD38 influence la transduction du signal liée à l’activation et à la différenciation des lymphocytes, ainsi qu’à la fonction de la synapse immunologique, et peut moduler l’état rédox cellulaire et la capacité métabolique via la disponibilité en NAD⁺. Les voies dépendantes de CD38 interfèrent avec la signalisation inflammatoire et le trafic des cellules immunitaires, ce qui fait de CD38 une cible fréquente des études d’immunométabolisme, des hémopathies malignes et des mécanismes des maladies inflammatoires chroniques. Son expression et sa production enzymatique sont également utilisées pour contextualiser les changements d’état cellulaire dans les microenvironnements tumoraux et lors de l’épuisement ou de l’activation immunitaires.

CD38 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD38 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD38. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD38. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD38.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.