Plasmide Double Nickase (h) CD37: sc-404423-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD37 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD37 Double Nickase (h) et le plasmide CD37 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD37. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD37 Antibody (M-B372): sc-23924
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD37 | sc-404423-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD37 | sc-404423-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD37 est une glycoprotéine de surface appartenant à la famille des tétraspanines, fortement enrichie sur les lymphocytes B matures et d’autres sous-populations de leucocytes, où elle organise des microdomaines membranaires qui coordonnent la signalisation des récepteurs, l’adhérence et le trafic intracellulaire. En servant de plateforme (scaffold) à des protéines partenaires et en régulant la signalisation proximale du récepteur des cellules B (BCR), CD37 influence des voies en aval qui contrôlent les seuils d’activation, la prolifération et la survie. Elle contribue à la formation de la synapse immunologique et à des processus endocytiques qui modèlent la gestion des antigènes et la communication intercellulaire. Des altérations de l’expression ou de la fonction de CD37 ont été impliquées dans une dérégulation immunitaire et dans la biologie des hémopathies malignes B, ce qui étaye son utilisation comme marqueur mécanistique dans les études de signalisation lymphoïde.
CD37 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD37 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD37. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD37. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD37.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.