Plasmide Double Nickase (h) CD26: sc-400862-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD26 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD26 Double Nickase (h) et le plasmide CD26 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DPP4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD26 Antibody (202.36): sc-7633
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD26 | sc-400862-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD26 | sc-400862-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DPP4 code pour CD26, une exopeptidase sérine de surface cellulaire qui retire des dipeptides N-terminaux des peptides dont l’avant-dernier acide aminé est une proline ou une alanine, modulant ainsi la biodisponibilité et le rayon d’action de signalisation des chimiokines, des incrétines et d’autres peptides bioactifs. Au-delà de son activité enzymatique, CD26 participe à la régulation immunitaire via des interactions avec l’adénosine désaminase et des composants de la matrice extracellulaire, influençant l’activation, l’adhésion et la migration des lymphocytes T. CD26 s’intègre à des voies contrôlant le trafic inflammatoire, l’homéostasie glucidique et la protéolyse extracellulaire, et son expression comme son activité sont associées à des troubles à médiation immunitaire, à des dérégulations métaboliques et à des microenvironnements immunitaires liés aux tumeurs. Sa localisation membranaire et son large répertoire de substrats font de DPP4 un point d’entrée utile pour étudier la communication intercellulaire et la signalisation régulée par les protéases.
CD26 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DPP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DPP4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DPP4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DPP4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.