Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD164 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424720
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD164 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD164, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD164 Anticuerpo (H-4): sc-271179
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD164 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424720 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cd164 codifica CD164, una glicoproteína sialomucina de superficie celular que favorece la adhesión celular y regula el tráfico de células hematopoyéticas y otras células progenitoras dentro de los microambientes tisulares. CD164 participa en el transporte endosomal y en la organización de receptores en la membrana plasmática, influyendo en la señalización y el comportamiento migratorio en vías vinculadas a las interacciones del nicho de células madre. En modelos murinos, la expresión o función alteradas de Cd164 se estudian en el contexto de la hematopoyesis, el desarrollo de células inmunitarias y la remodelación tisular. La desregulación de CD164 se ha asociado con cambios en la proliferación, la invasión y la comunicación con el microambiente, relevantes para la biología del cáncer y los mecanismos de enfermedades inflamatorias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD164 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd164 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd164 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd164 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD164.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd164 para la investigación de la señalización de CD164, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd164 críticos para la función de CD164
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd164 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD164 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD164 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd164. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD164 (m) y el plásmido HDR CD164 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd164 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd164 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.