Plasmide Double Nickase (h) CD161: sc-405895-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD161 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD161 Double Nickase (h) et le plasmide CD161 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KLRB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD161 Antibody (B199.2): sc-58963
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD161 | sc-405895-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD161 | sc-405895-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLRB1 code pour CD161, un récepteur de type lectine C fortement exprimé par certains sous-ensembles de cellules NK (natural killer) et de lymphocytes T, où il contribue à ajuster les seuils d’activation, la sécrétion de cytokines et les fonctions effectrices cytotoxiques. CD161 participe à des circuits immunorégulateurs qui gouvernent la différenciation des lymphocytes et leur homing tissulaire, en influençant des programmes de signalisation inflammatoire et la surveillance immunitaire. Des altérations de l’expression de KLRB1/CD161 et des fréquences de lymphocytes CD161+ ont été associées à une dysrégulation immunitaire dans l’inflammation chronique, l’auto-immunité et les microenvironnements immunitaires tumoraux. En tant que marqueur de surface cellulaire lié à des états fonctionnels des lymphocytes, CD161 est fréquemment utilisé en immunophénotypage par cytométrie en flux et dans des études mécanistiques des réponses des cellules NK et T.
CD161 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KLRB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KLRB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KLRB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KLRB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.