CD137L CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423455

개요

Tnfsf9는 CD137L(4-1BBL)을 암호화하며, CD137L은 주로 항원제시세포(APC)에 발현되는 TNF 초가족 리간드로서 CD137(TNFRSF9)과 결합해 T 세포 및 기타 면역 효과기에 강력한 공동자극 신호를 전달합니다. CD137L–CD137 신호전달은 NF-κB 및 MAPK 경로의 활성화를 촉진하여 T 세포의 증식, 생존, 사이토카인 생성, 기억 반응의 형성을 뒷받침하며, 수지상세포 성숙과 골수계 세포 기능에도 추가적인 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서 Tnfsf9의 활성은 염증 회로 조절과 면역 항상성 유지에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 자가면역, 만성 염증, 종양 면역 감시와 같은 맥락에 영향을 줍니다. 이러한 역할 때문에 CD137L은 공동자극 의존적 면역 표현형과 항원 유도 반응을 분석하는 데 유용한 표적(노드)입니다.

CD137L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tnfsf9 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tnfsf9 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tnfsf9의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CD137L 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CD137L 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tnfsf9 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CD137L 기능에 중요한 Tnfsf9 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tnfsf9 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CD137L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CD137L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tnfsf9 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CD137L HDR 플라스미드 (m) 및 CD137L HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tnfsf9 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tnfsf9 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.