CCL14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406423

Visão geral

CCL14 codifica uma quimiocina CC secretada que ajuda a coordenar o tráfego de leucócitos ao interagir com receptores de quimiocinas em monócitos, linfócitos e outros subgrupos de células imunes, moldando assim gradientes inflamatórios e o posicionamento de células imunes nos tecidos. Como parte da rede mais ampla de quimiocinas, a CCL14 contribui para a quimiotaxia, a modulação da sinalização de citocinas e o cross-talk com vias que regulam a ativação endotelial e a remodelação da matriz extracelular. A sinalização de quimiocinas desregulada envolvendo a CCL14 tem sido associada a padrões alterados de infiltração imune observados em estados inflamatórios crônicos e na inflamação associada a tumores, nos quais mudanças nos sinais quimiotáticos podem influenciar a vigilância imune e as interações com o estroma. Assim, a CCL14 é frequentemente estudada em contextos como ensaios de migração de células imunes, perfilamento de sinalização inflamatória e mapeamento em nível de sistemas de redes de quimiocinas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CCL14 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCL14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCL14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCL14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CCL14.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCL14 para a investigação da sinalização de CCL14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCL14 críticos para a função CCL14
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCL14 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CCL14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CCL14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCL14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CCL14 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CCL14 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCL14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCL14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.