Plasmide Double Nickase (h) caspase-10: sc-416840-NIC

CASP10 code la caspase‑10, une protéase initiatrice à cystéine‑aspartate recrutée au sein des complexes de signalisation induisant la mort, en aval des récepteurs d’apoptose extrinsèque tels que FAS et TNFRSF10 (récepteurs de TRAIL). Une fois activée, la caspase‑10 traite et amplifie le signal apoptotique via les caspases effectrices en aval et par un dialogue avec les voies mitochondriales, orientant les décisions de destinée cellulaire lors de l’homéostasie immunitaire et du stress inflammatoire. L’activité de CASP10 s’inscrit à l’interface des contextes de signalisation NF‑κB et des cytokines, où des issues apoptotiques versus non apoptotiques influencent la survie et l’activation des lymphocytes. Des variations génétiques ou une dérégulation de CASP10 ont été associées à des phénotypes de dysrégulation immunitaire et à une sensibilité modifiée à l’apoptose dans la biologie des tumeurs hématologiques et solides, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la signalisation des récepteurs de mort.

caspase-10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CASP10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CASP10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CASP10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CASP10.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.