Cappuccino CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407008

개요

인간 BLOC1S4 유전자는 카푸치노(cappuccino)를 암호화하며, 이는 리소좀 관련 소기관 복합체 1(BLOC-1) 생합성의 핵심 구성 요소입니다. BLOC-1은 특수화된 소기관의 성숙에 필요한 엔도좀 막 수송과 화물(cargo) 분류를 조율합니다. BLOC-1 기능은 엔도좀–리소좀 시스템을 통해 단백질 화물의 소포 출아, 재활용, 전달을 지원하여, 색소 과립 생합성과 특수화된 세포의 분비 경로 같은 과정에 영향을 줍니다. BLOC-1 소단위체가 교란되면 세포 내 수송과 소포 역학이 흐트러지며, 이는 리소좀 관련 소기관 이상과 연관된 질환뿐 아니라 엔도좀 수송 기능장애와 연결된 더 광범위한 신경발달 및 시냅스 표현형과도 관련이 있습니다. 따라서 BLOC1S4는 엔도좀 분류, 소기관 생합성, 그리고 막 수송 변화로 인한 경로 수준의 결과를 다루는 맥락에서 흔히 연구됩니다.

Cappuccino CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 BLOC1S4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 BLOC1S4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 BLOC1S4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cappuccino 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cappuccino 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 BLOC1S4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cappuccino 기능에 중요한 BLOC1S4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 BLOC1S4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cappuccino CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Cappuccino CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 BLOC1S4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cappuccino HDR 플라스미드 (h) 및 Cappuccino HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 BLOC1S4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 BLOC1S4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.