CaMKV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433479
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CaMKV O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CaMKV, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CaMKV Anticorpo (2F3-1A2): sc-517082
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CaMKV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433479 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Camkv codifica a CaMKV, uma proteína atípica do tipo quinase dependente de calmodulina, enriquecida em neurônios e implicada na sinalização dependente de atividade. Embora seja descrita como tendo atividade catalítica limitada ou atípica em comparação com as CaMKs canônicas, a CaMKV participa de redes regulatórias ligadas a Ca2+/calmodulina que influenciam a sinalização sináptica, a organização do citoesqueleto e a diferenciação neuronal. Por meio desses processos, Camkv tem sido associado a vias que governam o crescimento de neuritos e a plasticidade, tornando-o relevante para estudos mecanísticos do desenvolvimento e da disfunção do sistema nervoso. A regulação alterada de nós de sinalização responsivos a Ca2+, como a CaMKV, é frequentemente investigada no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos em sistemas modelo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CaMKV (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Camkv em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Camkv, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Camkv na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CaMKV.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Camkv para a investigação da sinalização de CaMKV, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Camkv críticos para a função CaMKV
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Camkv para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CaMKV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CaMKV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Camkv. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CaMKV Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CaMKV (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Camkv para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Camkv definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.