Plasmide Double Nickase (h) C/EBP δ: sc-400772-NIC

CEBPD code le facteur de transcription C/EBPδ, une protéine à fermeture éclair leucine basique (bZIP) qui régule des programmes d’expression génique contrôlant la signalisation inflammatoire, les réponses de phase aiguë et le contrôle de la croissance induit par le stress. C/EBPδ intègre des signaux issus des cytokines et des voies de l’immunité innée, notamment les réseaux associés à IL-6/JAK–STAT et à NF-κB, et contribue à la différenciation ainsi qu’à l’adaptation métabolique dans de nombreux types cellulaires. Son activité influence la régulation du cycle cellulaire, l’apoptose et la sénescence via le contrôle transcriptionnel d’effecteurs en aval. Une expression ou une signalisation dérégulée de CEBPD a été associée à des contextes d’inflammation chronique et de biologie tumorale, ce qui en fait un nœud mécanistique pertinent en immunologie et en recherche sur le cancer.

C/EBP δ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CEBPD dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CEBPD. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CEBPD. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CEBPD.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.