Plasmide Double Nickase (m) BRD9: sc-430581-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) BRD9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BRD9 Double Nickase (m) et le plasmide BRD9 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Brd9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) BRD9 | sc-430581-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) BRD9 | sc-430581-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Brd9** code **BRD9**, un lecteur des marques d’acétyl-lysine contenant un bromodomaine, qui agit comme sous-unité centrale du complexe non canonique de remodelage de la chromatine BAF (ncBAF/GBAF). En couplant la reconnaissance de l’acétylation des histones au repositionnement des nucléosomes dépendant de l’ATP, BRD9 contribue à réguler l’accessibilité des enhancers et des promoteurs, les programmes transcriptionnels et les transitions d’état cellulaire. L’activité de BRD9 s’inscrit à l’interface du contrôle épigénétique de la prolifération, de la différenciation et des réponses aux dommages de l’ADN, via des voies d’organisation de la chromatine et de régulation transcriptionnelle. Le dérèglement du remodelage de la chromatine associé à BRD9 a été relié à des altérations de la spécification de lignée et à des dépendances transcriptionnelles oncogéniques, faisant de **Brd9** une cible utile pour des études mécanistiques de l’organisation du génome et de la régulation de gènes pertinente pour le cancer.
BRD9 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Brd9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Brd9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Brd9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Brd9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.