Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO BRD3 (m): sc-426528
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- BRD3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique BRD3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BRD3 Antibody (2088C3a): sc-81202
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BRD3 (m) | sc-426528 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Brd3 code BRD3, un membre de la famille BET de protéines contenant des bromodomaines, qui se lient aux lysines acétylées des histones afin d’interpréter les marques de la chromatine et de coordonner des programmes transcriptionnels. Dans le noyau, BRD3 contribue à la régulation des gènes dépendante de l’ARN polymérase II, à l’activité des enhancers et au contrôle transcriptionnel lié au cycle cellulaire, via des interactions avec la chromatine acétylée et des co‑régulateurs transcriptionnels. Ces fonctions placent BRD3 au sein de voies de signalisation épigénétiques qui influencent la différenciation, la prolifération et l’expression génique en réponse au stress. Une activité dérégulée des protéines BET, y compris des réseaux transcriptionnels associés à BRD3, a été impliquée dans des états d’expression génique oncogéniques et des contextes de signalisation inflammatoire, ce qui souligne sa pertinence pour la modélisation mécanistique des maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BRD3 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Brd3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Brd3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Brd3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BRD3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Brd3 pour l'étude de la signalisation de BRD3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Brd3 essentiels à la fonction de BRD3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Brd3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le BRD3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le BRD3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Brd3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le BRD3 plasmide HDR (m) et le BRD3 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Brd3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Brd3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.