BRCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400700-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BRCA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BRCA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BRCA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BRCA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BRCA2 Anticorpo (D-8): sc-518154
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BRCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRCA2 codifica um supressor tumoral nuclear que coordena o reparo de quebras de dupla fita no DNA com alta fidelidade por recombinação homóloga, por meio da regulação do carregamento e da estabilização do filamento de RAD51 nas extremidades de DNA resecadas. Atua em forquilhas de replicação estagnadas para proteger o DNA nascente e favorecer o reinício da forquilha, conectando a atividade de BRCA2 às respostas ao estresse replicativo e aos checkpoints de integridade do genoma. A disfunção de BRCA2 leva à instabilidade cromossômica e à hipersensibilidade a estresses que danificam o DNA, tornando-o um nó central nos estudos das vias de reparo do DNA. Alterações genéticas em BRCA2 estão fortemente associadas à suscetibilidade a cânceres hereditários e esporádicos, e o status de BRCA2 é amplamente utilizado em pesquisa para investigar deficiência de recombinação homóloga e sinalização de dano ao DNA.
BRCA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BRCA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BRCA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BRCA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BRCA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.