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BMP-3慢病毒激活颗粒(m2) | sc-430986-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Bmp3 基因编码 BMP-3,它是 TGF-β 超家族的一种分泌型成员,作为细胞外调控因子参与调节成骨信号并维持骨骼组织稳态。BMP-3 通过影响 BMP/TGF-β 通路活性来调控骨形成,其中包括与 SMAD 依赖的转录程序发生串扰,从而控制成骨细胞分化与基质沉积。遗传学与表达研究表明,BMP-3 信号的改变与骨矿物质密度差异及骨骼发育表型相关,支持其在骨化受损与骨重塑模型中的重要性。在小鼠体系中对 Bmp3 进行基因编辑,可用于机制性解析骨骼信号网络、间充质祖细胞中的谱系特异性效应,以及在发育与疾病相关情境下的下游转录变化和细胞外基质反应。
BMP-3 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Bmp3 表达。
BMP-3 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Bmp3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BMP-3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Bmp3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。