BMCP1 (UCP5) CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405051

概要

SLC25A14はBMCP1（UCP5）をコードしており、BMCP1（UCP5）は脱共役タンパク質ファミリーに属するミトコンドリア内膜のキャリアです。プロトン伝導性とミトコンドリア膜電位を調節することで酸化的リン酸化の効率と細胞のエネルギーバランスに影響を与えます。UCP5の活性は、ミトコンドリア由来の活性酸素種（ROS）産生、カルシウム制御、ストレス誘導性のミトコンドリア機能障害への感受性に関与し、レドックス恒常性および神経細胞のバイオエネルゲティクスと結び付けられています。発現は神経系で高い傾向があり、UCP5の制御異常は、結合効率や酸化ストレスが乱れる神経変性、代謝ストレス、ミトコンドリア疾患に関連する機序の観点から検討されています。

BMCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC25A14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC25A14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC25A14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMCP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMCP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC25A14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMCP1の機能に不可欠なSLC25A14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC25A14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC25A14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMCP1 HDRプラスミド（h）および BMCP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC25A14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC25A14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。