Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BLM hydrolase (h): sc-404411
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- BLM hydrolase Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique BLM hydrolase, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BLM hydrolase Antibody (F-9): sc-166777
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BLM hydrolase (h) | sc-404411 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène humain BLMH code la bléomycine hydrolase, une aminopeptidase cytosolique à cystéine impliquée dans le traitement protéolytique des peptides intracellulaires et le maintien du contrôle qualité des protéines. BLMH participe au recyclage des acides aminés et a été associée aux réponses cellulaires au stress via ses effets sur le renouvellement des peptides et les réseaux de protéostasie. Une activité altérée de BLMH a été étudiée dans des contextes de métabolisme des médicaments et de sensibilité à la cytotoxicité induite par la bléomycine, et a également été explorée pour d’éventuels liens avec des phénotypes neurodégénératifs et inflammatoires, où les voies d’élimination des peptides sont perturbées. En tant qu’enzyme largement exprimée, BLMH constitue un nœud utile pour étudier la manière dont l’homéostasie dépendante des peptidases s’articule avec le stress oxydant et la signalisation des réponses aux dommages.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BLM hydrolase (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BLMH dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BLMH, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BLMH à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BLM hydrolase.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BLMH pour l'étude de la signalisation de BLM hydrolase, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de BLMH essentiels à la fonction de BLM hydrolase
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BLMH pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le BLM hydrolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BLM hydrolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BLMH. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le BLM hydrolase plasmide HDR (h) et le BLM hydrolase (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BLMH pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BLMH définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.