Chaque produit CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid consiste en un pool de 3 plasmides conçus pour assurer l'identification et le clivage d'un gène spécifique pour une efficacité maximale du knock-out. Chaque plasmide encode une séquence unique de 20 nt dérivée de la bibliothèque GeCKO (v2). Les plasmides HDR fournissent un modèle de réparation de l'ADN spécifique pour un DSB, et ne sont utilisés que lorsqu'ils sont co-transfectés avec les plasmides CRISPR/Cas9 KO. Les plasmides Double Nickase consistent en une paire de plasmides codant chacun pour une nucléase Cas9 mutée D10A et un ARN guide (ARNg) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour bloquer l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que son homologue CRISPR/Cas9 KO. L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine pour la sélection ; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection.
beta Actin Plasmides CRISPR (h)
- Espèce cible : human ; pour le produit mouse correspondant, voir beta Actin CRISPR Plasmids (m).
- Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de beta Actin dérivées de la base de données GeCKO (v2)
- Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
- Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
- Le knockout ou l'activation d'un gène peuvent être évalués en utilisant beta Actin Antibody (C4): sc-47778
- Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.
ACCÈS RAPIDE AUX LIENS
Informations pour la commande
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Plasmides Double Nickase
Plasmides d'Activation CRISPR
Produits de Contrôle recommandés
VOIR ÉGALEMENT...
Actin Anticorps pour l'analyse des réponses cellulaires aux produits CRISPR Actin
Pour plus d'information sur les systèmes CRISPR cliquez ici
Les Plasmides KO CRISPR/Cas9, Plasmides Double Nickase et Plasmides d'Activation CRISPR/dCas9 sont considérés comme des "Produits sous Licence" et doivent être utilisés conformément à la Licence/Etiquette limitée. Pour en savoir plus, Cliquez ici
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Les Plasmides CRISPR/Cas9 Knockout (KO) beta Actin (h2) consistent en un mélange de trois plasmides chacun codant la nucléase Cas9 et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique de beta Actin, élaboré pour une extinction (knockout) optimale.
- Les séquences D'ARN guide (gARN) sont issues de la bibliothèque GeCKO (v2) et dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure du double brin (DSB) d'ADN génomique au niveau d'un site spécifique (%link_11%)
- Pour sélectionner les cellules ayant intégré un site de rupture de l'ADN induit par la Cas9, il est recommandé de co-transfecter avec le Plasmide HDR beta Actin HDR Plasmid (h2) (sc-400000-HDR-2)
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: beta Actin Antibody (C4): sc-47778
Voir Protocole En ligne.
TÉLÉCHARGEMENTS
ACCÈS RAPIDE AUX LIENS
Produits associés
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plamide HDR beta Actin (h2) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO beta Actin (h2)
- Le Plasmide HDR beta Actin (h2) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant beta Actin (h2)
- Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
- Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
- Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923
Voir Protocole En ligne.
TÉLÉCHARGEMENTS
ACCÈS RAPIDE AUX LIENS
Produits associés
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) beta Actin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h2) beta Actin diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h) beta Actin
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: beta Actin Antibody (C4): sc-47778
Voir Protocole En ligne.
TÉLÉCHARGEMENTS
ACCÈS RAPIDE AUX LIENS
Produits associés
Description
Voir Protocole En ligne.
TÉLÉCHARGEMENTS
ACCÈS RAPIDE AUX LIENS
Produits associés
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO beta Actin (h2) | sc-400000-KO-2 | 20 µg | $397.00 | |||
Plasmid HDR beta Actin (h2) | sc-400000-HDR-2 | 20 µg | $445.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h) beta Actin | sc-400000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) beta Actin | sc-400000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h2) beta Actin | sc-400000-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |