Bcl-6 Double Nickase Plasmid (h): sc-400265-NIC

Das humane Gen **BCL6** kodiert **Bcl-6**, einen BTB/POZ-Zinkfinger-Transkriptionsrepressor, der Genexpressionsprogramme koordiniert, welche die Bildung, Proliferation und Differenzierung von Keimzentrums‑B‑Zellen steuern. Bcl-6 moduliert Chromatin und transkriptionelle Outputs, indem es Korepressor-Komplexe rekrutiert, und begrenzt dadurch DNA-Schadensantworten, Apoptose und inflammatorische Signalwege, um streng regulierte Entwicklungskontrollpunkte aufrechtzuerhalten. Funktionell ist es mit Signalwegen wie **NF‑κB**, **p53**‑abhängigen Stressantworten und der durch Zytokine getriebenen **JAK/STAT**‑Signalübertragung verknüpft und prägt so Schicksalsentscheidungen von Immunzellen. Eine fehlregulierte BCL6‑Aktivität und veränderte Netzwerke transkriptioneller Repression sind eng mit der Biologie von B‑Zell‑Malignomen und Immunfehlregulation assoziiert, weshalb BCL6 häufig Ziel mechanistischer Studien zur lymphoiden Transformation und zur Kontrolle der Transkription ist.

Bcl-6 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BCL6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BCL6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BCL6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BCL6-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.