Plasmide CRISPR/Cas9 KO BANK1 (h): sc-405620

Présentation

BANK1 (B-cell scaffold protein with ankyrin repeats 1) est une protéine adaptatrice enrichie dans les lymphocytes B, qui intègre les signaux en aval du récepteur de l’antigène des cellules B ainsi que des récepteurs de l’immunité innée afin de façonner l’activation, la mobilisation du calcium et les réponses transcriptionnelles. En favorisant, via sa fonction d’échafaudage, l’assemblage de complexes de signalisation, BANK1 influence des voies liées à la signalisation NF-κB et MAPK, et peut moduler les réponses cytokiniques ainsi que les programmes de différenciation des cellules B. Des études génétiques et d’expression associent BANK1 à une dérégulation immunitaire et à une susceptibilité à des phénotypes auto-immuns, notamment le lupus érythémateux systémique, ce qui étaye sa pertinence dans les réseaux de signalisation inflammatoire. En tant que régulateur de l’architecture de signalisation des cellules B, BANK1 est fréquemment étudiée dans des contextes tels que l’activation induite par l’antigène, les points de contrôle de la tolérance et la communication croisée avec des réponses liées à l’interféron.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BANK1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BANK1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BANK1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BANK1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BANK1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BANK1 pour l'étude de la signalisation de BANK1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de BANK1 essentiels à la fonction de BANK1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BANK1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le BANK1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BANK1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BANK1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le BANK1 plasmide HDR (h) et le BANK1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BANK1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BANK1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.