Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) B7-H3: sc-402032-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) B7-H3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide B7-H3 Double Nickase (h) et le plasmide B7-H3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD276. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: B7-H3 Antibody (F-11): sc-376769
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) B7-H3 | sc-402032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) B7-H3 | sc-402032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD276 code pour la glycoprotéine de surface immunorégulatrice B7-H3, membre de la famille B7, qui module la signalisation des lymphocytes T et de l’immunité innée et qui est également liée à des programmes intrinsèques à la cellule dans la biologie du cancer. Dans les tissus humains, B7-H3 influence les réseaux de cytokines et des interactions de type points de contrôle immunitaire, tout en affectant des voies associées à l’adhésion, à la migration et à la signalisation de survie. Une expression dérégulée de CD276 est fréquemment observée dans les tumeurs solides et a été associée à des phénotypes d’échappement immunitaire ainsi qu’à une communication altérée au sein du microenvironnement tumoral. Ces propriétés font de CD276 une cible utile pour des études mécanistiques de l’immunomodulation et des circuits de signalisation associés aux tumeurs.
B7-H3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD276 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD276. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD276. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD276.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.