Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO AWP1 (m): sc-425748
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AWP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AWP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AWP1 Antibody (B-5): sc-398513
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AWP1 (m) | sc-425748 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Zfand6 code pour AWP1, une protéine à doigt de zinc contenant un domaine de type AN1, impliquée dans la régulation ubiquitine‑dépendante du renouvellement des protéines et dans la signalisation du stress cellulaire. AWP1 a été associée à la modulation des voies inflammatoires et de l’immunité innée, notamment la voie NF‑κB, via des interactions avec des substrats ubiquitinylés et des composants des réseaux de ligases de l’ubiquitine. Dans les systèmes murins, l’expression et la fonction de Zfand6 sont étudiées dans le contexte de la protéostasie, de la transduction du signal et des réponses cellulaires aux cytokines et au stress. La dérégulation du contrôle médié par l’ubiquitine et de la signalisation inflammatoire est largement pertinente pour comprendre les mécanismes à l’œuvre dans la cancérologie, la neurodégénérescence et les pathologies d’origine immunitaire, ce qui fait de Zfand6 un nœud utile pour l’exploration des voies de signalisation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AWP1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Zfand6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Zfand6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Zfand6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AWP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Zfand6 pour l'étude de la signalisation de AWP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Zfand6 essentiels à la fonction de AWP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Zfand6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AWP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le AWP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Zfand6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AWP1 plasmide HDR (m) et le AWP1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Zfand6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Zfand6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.