Plasmide Double Nickase (h) atrophin-1: sc-407398-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) atrophin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide atrophin-1 Double Nickase (h) et le plasmide atrophin-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: atrophin-1 Antibody (C1): sc-517594
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) atrophin-1 | sc-407398-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) atrophin-1 | sc-407398-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ATN1 humain code l’atrophine‑1, un corégulateur transcriptionnel nucléaire qui s’associe à des facteurs de liaison à l’ADN pour moduler des programmes d’expression génique impliqués dans le développement neuronal, la différenciation et la répression dépendante de la chromatine. L’atrophine‑1 participe à des réseaux transcriptionnels liés à la signalisation de type Notch et au contrôle épigénétique du destin neuronal, influençant des états régulateurs spécifiques de type cellulaire dans le système nerveux central. L’expansion polyglutaminique de l’atrophine‑1 est associée à l’atrophie dentatorubrale‑pallidoluysienne (DRPLA), ce qui étaye sa pertinence pour les études sur la neurodégénérescence, l’homéostasie des protéines et la dérégulation transcriptionnelle. La perturbation d’ATN1 est donc largement utilisée pour explorer les mécanismes de vulnérabilité neuronale sélective et les circuits de régulation génique dans des modèles cellulaires humains.
atrophin-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.