Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) ATGL: sc-401711-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATGL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATGL Double Nickase (h) et le plasmide ATGL Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PNPLA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ATGL Antibody (F-7): sc-365278
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATGL | sc-401711-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATGL | sc-401711-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PNPLA2 code pour la lipase des triglycérides du tissu adipeux (ATGL), l'enzyme limitante qui initie l'hydrolyse des triacylglycérols au niveau des gouttelettes lipidiques afin de libérer des diacylglycérols et des acides gras libres. L'activité d'ATGL est coordonnée avec les protéines des gouttelettes lipidiques et des cofacteurs pour réguler la lipolyse, la disponibilité en carburant et l'adaptation métabolique, reliant le renouvellement intracellulaire des lipides neutres à la β‑oxydation mitochondriale et, plus largement, à l'homéostasie énergétique. Dans les cellules humaines, une altération de la fonction PNPLA2/ATGL est associée à un stockage lipidique dérégulé et à un stress lipotoxique, ce qui relie cette voie à des mécanismes pertinents pour les phénotypes métaboliques et la recherche sur la biologie des gouttelettes lipidiques.
ATGL Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PNPLA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PNPLA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PNPLA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PNPLA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.