Plasmide Double Nickase (h) ART1: sc-403742-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ART1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ART1 Double Nickase (h) et le plasmide ART1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ART1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ART1 | sc-403742-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ART1 | sc-403742-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ART1 (ecto-ADP-ribosyltransférase 1) est une enzyme ancrée à la surface cellulaire via un glycosylphosphatidylinositol (GPI), qui catalyse la mono‑ADP‑ribosylation de protéines cibles en utilisant le NAD+ extracellulaire. Cette modification post-traductionnelle peut influencer la signalisation des récepteurs, les interactions cellule–cellule et la dynamique d’adhérence, et a été associée à la modulation des réponses immunitaires et inflammatoires. L’activité d’ART1 est liée à la régulation de la signalisation purinergique et de voies dépendantes du NAD+ extracellulaire qui façonnent la communication cellulaire au sein des microenvironnements tissulaires. Des altérations de l’expression ou de l’activité d’ART1 ont été rapportées dans des contextes pertinents pour la biologie du cancer, l’inflammation des voies aériennes et la fonction des cellules vasculaires, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique pour étudier l’ADP‑ribosylation extracellulaire dans les cellules humaines.
ART1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ART1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ART1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ART1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ART1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.