Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ARID3A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404552
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ARID3A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ARID3A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARID3A Anticuerpo (A-4): sc-398367
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ARID3A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404552 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ARID3A (dominio de interacción 3A rico en AT) es un factor de transcripción que se une al ADN y regula la accesibilidad de la cromatina y programas de expresión génica específicos de linaje. En los sistemas hematopoyéticos está fuertemente vinculado al desarrollo de las células B y a la regulación de los genes de inmunoglobulinas, integrándose en redes transcripcionales que coordinan la diferenciación, la proliferación y la apoptosis. La actividad de ARID3A influye en el control epigenético de los loci diana y puede afectar las respuestas celulares a señales del desarrollo y del estrés. La expresión o función desregulada de ARID3A se ha asociado con fenotipos alterados de células inmunitarias y se ha estudiado en contextos que incluyen neoplasias hematológicas y autoinmunidad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ARID3A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ARID3A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ARID3A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ARID3A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ARID3A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ARID3A para la investigación de la señalización de ARID3A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ARID3A críticos para la función de ARID3A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ARID3A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ARID3A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ARID3A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ARID3A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ARID3A (h) y el plásmido HDR ARID3A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ARID3A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ARID3A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.