Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO apoB (m): sc-433607
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- apoB Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique apoB, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: apoB Antibody (A-6): sc-393636
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO apoB (m) | sc-433607 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Apob chez la souris code l’apolipoprotéine B (apoB), l’apolipoprotéine structurale essentielle requise pour l’assemblage et la sécrétion des lipoprotéines riches en triglycérides, notamment les chylomicrons et les VLDL, ainsi que pour la formation ultérieure des LDL. ApoB coordonne la biogenèse des lipoprotéines dans le réticulum endoplasmique via des interactions avec la protéine microsomale de transfert des triglycérides (MTP), reliant la gestion des lipides au niveau hépatique et intestinal au transport systémique du cholestérol. En gouvernant le nombre et la composition des particules, apoB influence l’engagement des récepteurs des lipoprotéines, l’absorption des lipides et les voies de signalisation métabolique en aval. La dérégulation des voies dépendantes d’APOB est largement utilisée pour modéliser chez la souris l’hyperlipidémie, les phénotypes de stéatose hépatique et le trafic lipidique pertinent pour l’athérosclérose.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO apoB (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Apob dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Apob, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Apob à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine apoB.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Apob pour l'étude de la signalisation de apoB, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Apob essentiels à la fonction de apoB
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Apob pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le apoB plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le apoB plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Apob. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le apoB plasmide HDR (m) et le apoB (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Apob pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Apob définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.