Plasmide Double Nickase (h) apoA-II: sc-404987-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) apoA-II correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide apoA-II Double Nickase (h) et le plasmide apoA-II Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APOA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: apoA-II Antibody (ZZ6): sc-101261
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) apoA-II | sc-404987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) apoA-II | sc-404987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOA2 code l’apolipoprotéine A‑II (apoA‑II), un composant structural majeur des lipoprotéines de haute densité (HDL) qui module la stabilité des particules lipoprotéiques, la liaison aux lipides et leur remodelage dans la circulation. L’apoA‑II influence des étapes clés de la prise en charge du cholestérol et des triglycérides en affectant les interactions avec des facteurs de transfert lipidique et des facteurs lipolytiques, façonnant ainsi le transport inverse du cholestérol et, plus largement, les voies du métabolisme lipidique. Des variations de l’expression ou de la séquence d’APOA2 ont été associées à des profils lipidiques plasmatiques modifiés et à un risque accru de traits cardiométaboliques, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique dans les études de dyslipidémie et d’homéostasie métabolique. Des modèles in vitro et in vivo ciblant l’apoA‑II permettent d’explorer la composition des HDL, les flux lipidiques et les processus inflammatoires ou oxydatifs en aval liés à la biologie de l’athérosclérose.
apoA-II Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APOA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APOA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APOA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APOA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.