Particules Lentivirales d'Activation (h) APLNR: sc-402374-LAC

Le gène humain **APLNR** code le récepteur de l’apéline (**APJ**), un **RCPG** (récepteur couplé aux protéines G) à sept domaines transmembranaires qui se lie aux peptides apéline ainsi qu’à **ELA/Toddler** afin de réguler des programmes de signalisation cellulaire liés à la biologie vasculaire. Après liaison du ligand, APLNR se couple à **Gαi/o** et à des voies associées pour moduler la signalisation des seconds messagers, les flux calciques et des cascades de kinases, notamment **MAPK/ERK** et **PI3K/AKT**, influençant la fonction endothéliale, les réponses angiogéniques et l’homéostasie cardiométabolique. L’activité d’APLNR est étudiée dans le développement et le remodelage cardiovasculaires, la signalisation associée à l’hypoxie et les interactions inflammatoires dans le microenvironnement vasculaire. Une dérégulation de la signalisation d’APLNR a été associée à des phénotypes pertinents pour plusieurs maladies, notamment l’insuffisance cardiaque, l’hypertension pulmonaire, des troubles métaboliques et l’angiogenèse associée aux tumeurs, ce qui soutient des études mécanistiques dans des modèles cellulaires appropriés.

Les particules d'activation lentivirales APLNR (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de APLNR dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales APLNR (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription APLNR, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de APLNR. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif APLNR ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.