Plasmide Double Nickase (h) ANO6: sc-402736-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ANO6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ANO6 Double Nickase (h) et le plasmide ANO6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANO6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ANO6 | sc-402736-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ANO6 | sc-402736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANO6 (anoctamine 6, TMEM16F) code une scramblase de phospholipides et un canal ionique activés par le Ca2+, qui régulent le mouvement bidirectionnel des phospholipides à travers la membrane plasmique. En couplant la signalisation calcique à l’asymétrie lipidique membranaire, ANO6 favorise l’externalisation de la phosphatidylsérine, le bourgeonnement de microparticules et le remodelage de la membrane plasmique lors de l’activation plaquettaire et d’autres réponses au stress. Ces activités recoupent les voies de la coagulation et de l’apoptose et influencent la fonction des cellules immunitaires via leurs effets sur la dynamique membranaire et les complexes de signalisation. Une dérégulation de la fonction d’ANO6 a été associée à des défauts d’hémostase, à une altération de la signalisation de la mort cellulaire et à des phénotypes d’instabilité membranaire pertinents pour la recherche en biologie du sang, de l’immunité et du cancer.
ANO6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANO6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANO6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANO6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANO6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.