Particules Lentivirales d'Activation (m) Angptl2: sc-424003-LAC

L’angiopoïétine‑like 2 murine (Angptl2) est une glycoprotéine sécrétée qui module la biologie vasculaire et stromale en influençant le comportement des cellules endothéliales, le remodelage de la matrice extracellulaire et l’inflammation tissulaire. Elle est couramment associée à des réseaux de signalisation pro‑inflammatoires, notamment à des programmes transcriptionnels liés à NF‑κB, et peut orienter le recrutement des leucocytes ainsi que l’activation des macrophages dans des tissus lésés ou soumis à un stress métabolique. L’expression d’Angptl2 a été associée à la dysfonction du tissu adipeux, à des états inflammatoires liés à la résistance à l’insuline, au remodelage vasculaire et à des modifications du microenvironnement associé aux tumeurs, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de l’inflammation chronique et de processus de type fibrotique. En tant que facteur circulant ou paracrine local, Angptl2 est fréquemment étudiée pour ses effets sur la communication cellule‑cellule et sur la signalisation des cytokines/chimiokines dans des modèles de lésions d’organes spécifiques.

Les particules d'activation lentivirales Angptl2 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Angptl2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Angptl2 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Angptl2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Angptl2. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Angptl2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.