Particules Lentivirales d'Activation (m) amphiregulin: sc-419185-LAC

Le gène murin **Areg** code l’amphiréguline, un ligand sécrété de la famille du facteur de croissance épidermique (EGF) qui se lie à l’EGFR et active la signalisation EGFR/ErbB afin de réguler la prolifération, la survie et la différenciation des cellules épithéliales et stromales. L’induction de l’amphiréguline est fréquemment associée à des programmes de remodelage tissulaire, notamment la réparation des plaies, le maintien de la barrière et les réponses inflammatoires, avec une activation en aval des voies MAPK/ERK et PI3K/AKT. Dans le microenvironnement immunitaire, l’amphiréguline peut être produite par des sous-populations de leucocytes activés et contribue à la communication paracrine entre les compartiments immunitaire et épithélial. Une expression dérégulée d’**Areg** est étudiée dans des contextes tels que l’inflammation chronique, la fibrose et la biologie tumorale, où la signalisation dépendante de l’EGFR influence l’état cellulaire et la dynamique du microenvironnement.

Les particules d'activation lentivirales amphiregulin (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Areg dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales amphiregulin (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Areg, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de amphiregulin. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Areg ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.