ALCAM Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419076-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALCAMO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALCAM (m) e o Plasmídeo Double Nickase ALCAM (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Alcam. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALCAM Anticorpo (B-6): sc-74558
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALCAM Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419076-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALCAM Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419076-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Alcam codifica a molécula de adesão celular de leucócitos ativados (ALCAM/CD166), um recetor de adesão da superfamília das imunoglobulinas que suporta interações homofílicas e heterofílicas na superfície celular. Em tecidos de rato, a ALCAM contribui para a estabilização do contacto célula–célula, para a organização epitelial e endotelial e para a orientação de células em migração, ligando complexos de adesão na membrana a programas de remodelação do citoesqueleto. A adesão mediada por ALCAM cruza-se com processos como o tráfego de células imunitárias, o crescimento de neuritos e a manutenção de nichos de células estaminais/progenitoras, nos quais alterações na dinâmica de adesão podem desviar a diferenciação e a arquitetura tecidular. A expressão ou localização desregulada de ALCAM tem sido associada a alterações na invasão e no potencial metastático em modelos de cancro e a microambientes inflamatórios, tornando Alcam um ponto útil para estudar a sinalização dependente de adesão e a remodelação tecidular.
ALCAM O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Alcam em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Alcam. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Alcam. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Alcam interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.