Plásmido Doble Nickase (h) AKAP 220: sc-405585-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AKAP 220 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AKAP 220 (h) y el plásmido de doble nickasa AKAP 220 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AKAP11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AKAP 220 | sc-405585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AKAP 220 | sc-405585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **AKAP11** codifica la **proteína de anclaje de la A-quinasa 220 (AKAP 220)**, un andamiaje que organiza espacialmente a la PKA junto con otras enzimas de señalización para modular respuestas de AMPc compartimentalizadas. Al anclar la actividad quinasa a dominios subcelulares definidos, AKAP 220 contribuye al control dependiente de fosforilación de la progresión del ciclo celular, la dinámica del citoesqueleto y la integración de señales impulsadas por receptores. La alteración de los microdominios de señalización mediados por AKAP11 se ha asociado con programas proliferativos y de respuesta al estrés modificados en contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en vías que acoplan la señalización por segundos mensajeros con cambios en el estado celular. Por ello, AKAP11 se investiga con frecuencia para comprender cómo un anclaje de PKA reconfigurado influye en salidas transcripcionales posteriores y en redes de proteostasis en células humanas.
AKAP 220 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AKAP11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AKAP11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AKAP11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AKAP11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.