Plasmide Double Nickase (h) Aiolos: sc-400764-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Aiolos correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Aiolos Double Nickase (h) et le plasmide Aiolos Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IKZF3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aiolos Antibody (3H5-G7): sc-293421
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Aiolos | sc-400764-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Aiolos | sc-400764-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IKZF3 code pour Aiolos, un facteur de transcription à doigts de zinc de la famille Ikaros, qui régule des programmes d’expression génique nécessaires à la maturation des lymphocytes, à la tolérance immunitaire et à la différenciation des cellules B. Aiolos s’intègre à des complexes de remodelage de la chromatine et de répression/activation transcriptionnelle afin de moduler les signaux en aval de la stimulation des récepteurs antigéniques et des voies dépendantes des cytokines. Une activité dérégulée d’IKZF3 a été associée à une homéostasie lymphocytaire altérée, à des réponses anticorps aberrantes et à une physiopathologie immuno‑médiée, ce qui en fait un nœud d’intérêt pour étudier le contrôle transcriptionnel dans les lignées hématopoïétiques. En tant que régulateur nucléaire, Aiolos est fréquemment étudié dans le contexte de la régulation épigénétique, de l’engagement de lignée et des réseaux de signalisation des cellules immunitaires.
Aiolos Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IKZF3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IKZF3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IKZF3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IKZF3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.