AGTRAP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419051

Descripción general

Agtrap codifica la proteína asociada al receptor de angiotensina II (AGTRAP), un regulador asociado a membrana que se une a AGTR1 e influye en el tráfico del receptor, su internalización y la dinámica de la señalización aguas abajo. Mediante la modulación de vías dependientes de angiotensina II, AGTRAP puede afectar la señalización MAPK/ERK, las respuestas de estrés celular y programas transcripcionales inflamatorios, lo que la vincula con la homeostasis tisular en los sistemas cardiovascular y renal. En modelos murinos, la alteración de la actividad de Agtrap se ha utilizado para investigar los mecanismos subyacentes a la regulación de la presión arterial, la remodelación vascular y la función renal. Estas propiedades convierten a AGTRAP en un nodo útil para estudiar la regulación de los GPCR y la señalización del sistema renina-angiotensina en tipos celulares fisiológicamente relevantes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO AGTRAP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Agtrap en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Agtrap junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Agtrap tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AGTRAP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Agtrap para la investigación de la señalización de AGTRAP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Agtrap críticos para la función de AGTRAP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Agtrap para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido AGTRAP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido AGTRAP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Agtrap. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AGTRAP (m) y el plásmido HDR AGTRAP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Agtrap para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Agtrap definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.