Plasmide Double Nickase (h) ADH7: sc-405066-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ADH7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ADH7 Double Nickase (h) et le plasmide ADH7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADH7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ADH7 | sc-405066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ADH7 | sc-405066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADH7 code l’alcool déshydrogénase 7 (classe IV), une oxydoréductase cytosolique dépendante du NAD(P)+ qui catalyse l’oxydation de l’éthanol ainsi que de divers alcools issus des rétinoïdes et des lipides, contribuant à la formation d’aldéhydes et à leur métabolisme en aval. Elle est fortement exprimée dans les épithéliums des voies digestives hautes, où elle intervient dans l’homéostasie des rétinoïdes, l’équilibre rédox et la détoxification des espèces carbonylées réactives. Par son rôle dans le métabolisme de l’éthanol/du rétinol et la prise en charge des aldéhydes, ADH7 est impliquée dans des voies influençant la différenciation épithéliale, les réponses au stress oxydatif et la biologie de la barrière. Des altérations de l’activité ou de l’expression d’ADH7 ont été étudiées dans le cadre des variations interindividuelles de la charge en aldéhydes liée à l’alcool et de la susceptibilité aux lésions épithéliales et à la carcinogenèse.
ADH7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADH7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADH7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADH7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADH7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.