Plasmide Double Nickase (h) ADH1: sc-402260-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ADH1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ADH1 Double Nickase (h) et le plasmide ADH1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADH1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ADH1 | sc-402260-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ADH1 | sc-402260-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **ADH1A** code l’alcool déshydrogénase 1A (ADH1), une oxydoréductase cytosolique dépendante du zinc qui catalyse l’oxydation, dépendante du **NAD⁺**, de l’éthanol et d’autres alcools aliphatiques à chaîne courte ainsi que d’alcools aromatiques en leurs aldéhydes correspondants. Cette activité contribue au métabolisme hépatique de l’alcool et des rétinoïdes, en influençant l’équilibre rédox et les flux métaboliques, ce qui peut affecter les réponses au stress oxydatif et les voies impliquées dans la gestion des lipides. Les variations ou la dérégulation de l’activité des alcool déshydrogénases sont étudiées dans le contexte des lésions tissulaires liées à l’éthanol et de phénotypes métaboliques, et l’expression d’**ADH1A** est fréquemment utilisée comme marqueur de l’état de différenciation des hépatocytes dans des systèmes expérimentaux. ADH1A/ADH1 constitue également un nœud d’étude pertinent pour disséquer la prise en charge des aldéhydes et la signalisation en aval associée aux programmes de stress cellulaire et d’inflammation.
ADH1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADH1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADH1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADH1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADH1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.