Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7: sc-403213-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase (h) et le plasmide Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADCY7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 | sc-403213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 | sc-403213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADCY7 code l’adénylate cyclase 7 (AC7), une enzyme associée à la membrane qui catalyse la conversion de l’ATP en AMPc (cAMP), un second messager central contrôlant la signalisation dépendante de la PKA et d’EPAC. L’activité d’AC7 est régulée en aval des GPCR via des protéines G hétérotrimériques, reliant des signaux extracellulaires à des programmes transcriptionnels, à la signalisation des cytokines et à l’activation des cellules immunitaires innées. En modulant la dynamique de l’AMPc, ADCY7 contribue à des voies impliquées dans les réponses inflammatoires, la signalisation du stress cellulaire et la régulation métabolique. Des variations génétiques ou une expression dérégulée d’ADCY7 ont été associées à des altérations de l’homéostasie immunitaire et à une susceptibilité accrue aux maladies inflammatoires, ce qui motive des études mécanistiques dans des modèles cellulaires humains pertinents.
Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADCY7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADCY7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADCY7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADCY7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.