Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1: sc-402115-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Double Nickase (h) et le plasmide Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADCY1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Antibody (F-10): sc-365350
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 | sc-402115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 | sc-402115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **ADCY1** code l’adénylate cyclase 1 (**AC1**), une enzyme membranaire stimulée par la calmoduline qui convertit l’ATP en **AMPc** en réponse aux signaux calciques. L’AMPc issu d’AC1 active **PKA** et **EPAC** et module en aval la transcription dépendante de **CREB**, façonnant l’excitabilité neuronale, la plasticité synaptique et l’expression génique dépendante de l’activité. En intégrant la signalisation des **RCPG** couplée au **Ca2+** à la dynamique des seconds messagers, **ADCY1** influence des voies associées à l’apprentissage et à la mémoire ainsi que des programmes neurodéveloppementaux plus larges. Une signalisation AMPc dérégulée, liée à une activité altérée d’ADCY1, a été étudiée dans le contexte de phénotypes neurologiques et neuropsychiatriques, ce qui étaye sa pertinence pour des investigations mécanistiques.
Adenylate cyclase 1/AC1/ADCY1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADCY1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADCY1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADCY1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADCY1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.