Plasmide Double Nickase (h) Acrosin: sc-402292-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Acrosin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Acrosin Double Nickase (h) et le plasmide Acrosin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Acrosin | sc-402292-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Acrosin | sc-402292-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACR code l’acrosine, une protéase à sérine de type trypsine stockée sous forme de proacrosine dans l’acrosome des spermatozoïdes humains et activée lors de la fécondation. L’acrosine contribue à la dispersion de la matrice acrosomique et à une protéolyse localisée de substrats glycoprotéiques au niveau de la zone pellucide, facilitant les interactions spermatozoïde–ovocyte et la pénétration. Sa fonction s’inscrit dans l’activation régulée des protéases, la dynamique de la réaction acrosomique et le remodelage de la matrice extracellulaire à l’interface des gamètes. Une altération de l’activité de l’acrosine ou de la protéostasie acrosomique a été associée à une diminution du potentiel de fécondation et fait l’objet d’études en biologie de la reproduction masculine et dans les phénotypes liés à l’infertilité.
Acrosin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.