Particules Lentivirales d'Activation (h) ACADVL (VLCAD): sc-403111-LAC

ACADVL code la très longue chaîne acyl‑CoA déshydrogénase (VLCAD), une flavoprotéine mitochondriale qui catalyse la première étape de déshydrogénation de la β‑oxydation des acyl‑CoA d’acides gras à longue chaîne. VLCAD soutient la production d’énergie à partir des acides gras, contribuant à l’équilibre rédox mitochondrial et à la flexibilité métabolique dans des tissus à forte demande oxydative comme le cœur et le muscle squelettique. Une perturbation ou une diminution de l’activité d’ACADVL est associée à une oxydation altérée des acides gras à longue chaîne, à des profils d’acylcarnitines modifiés et à des réponses de stress mitochondrial. Ces anomalies métaboliques sont étudiées dans le cadre des troubles héréditaires de l’oxydation des acides gras ainsi que dans des recherches plus larges sur le dysfonctionnement cardiométabolique et les mécanismes des maladies mitochondriales.

Les particules d'activation lentivirales ACADVL (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de ACADVL dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales ACADVL (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription ACADVL, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de ACADVL. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif ACADVL ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.