Plasmide Double Nickase (h) ABHD7: sc-408425-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABHD7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABHD7 Double Nickase (h) et le plasmide ABHD7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EPHX4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABHD7 | sc-408425-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABHD7 | sc-408425-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD7 humain (également référencé sous le nom EPHX4) code une hydrolase à sérine contenant un domaine α/β-hydrolase, dont on prévoit qu’elle participe au métabolisme des lipides et des esters au sein des membranes cellulaires. En tant que membre du vaste réseau des hydrolases à sérine, l’activité d’ABHD7 peut influencer la dynamique de la signalisation lipidique, l’homéostasie membranaire et les interactions métaboliques qui modulent les réponses au stress et la signalisation inflammatoire. Une régulation altérée des enzymes du métabolisme lipidique est fréquemment associée à une prolifération dérégulée, à une gestion perturbée du stress oxydant et à des modifications des transitions d’état cellulaire, faisant d’ABHD7 un nœud pertinent pour des études mécanistiques sur le remodelage des réseaux métaboliques et de signalisation. La caractérisation fonctionnelle d’ABHD7 soutient la recherche sur les voies lipidiques dépendantes d’enzymes et leurs liens avec des phénotypes cellulaires associés aux maladies dans des modèles humains.
ABHD7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EPHX4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EPHX4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EPHX4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EPHX4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.