Plasmide Double Nickase (h) A1BG: sc-403087-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) A1BG correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide A1BG Double Nickase (h) et le plasmide A1BG Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant A1BG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: A1BG Antibody (F-9): sc-374415
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) A1BG | sc-403087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) A1BG | sc-403087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’alpha-1B-glycoprotéine (A1BG) code une glycoprotéine plasmatique sécrétée appartenant à la superfamille des immunoglobulines, principalement produite par le foie et détectée dans la circulation ainsi que dans les fluides extracellulaires. Bien que sa fonction moléculaire précise reste imparfaitement définie, A1BG est fréquemment étudiée dans le contexte des réseaux d’interactions des protéines extracellulaires, du renouvellement des glycoprotéines et des états inflammatoires et métaboliques systémiques qui influencent le protéome plasmatique. Des variations de l’abondance d’A1BG ont été rapportées dans de multiples profils protéomiques associés à des maladies, ce qui étaye son utilisation comme cible liée à des biomarqueurs dans des workflows de découverte translationnelle. Dans des modèles cellulaires et tissulaires, l’étude d’A1BG peut aider à relier la dynamique des protéines sécrétées aux voies qui régissent la réponse de l’hôte, le remodelage tissulaire et la signalisation du microenvironnement.
A1BG Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus A1BG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de A1BG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de A1BG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de A1BG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.