Plasmide Double Nickase (h) α-defensin 4: sc-407288-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α-defensin 4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α-defensin 4 Double Nickase (h) et le plasmide α-defensin 4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DEFA4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α-defensin 4 | sc-407288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α-defensin 4 | sc-407288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DEFA4 code l’α‑défensine 4 humaine, un peptide antimicrobien cationique enrichi dans les granules des neutrophiles, qui contribue à la défense immunitaire innée aux interfaces muqueuses et épithéliales. Lors de sa libération pendant la dégranulation ou au cours de réponses associées aux NET, l’α‑défensine 4 peut perturber directement les membranes microbiennes et moduler la signalisation inflammatoire locale via des interactions avec des motifs moléculaires associés aux pathogènes et des récepteurs des cellules hôtes. Son activité s’inscrit à l’interface des programmes effecteurs des neutrophiles, de la chimiotaxie et des réseaux de cytokines qui façonnent les premières interactions hôte–pathogène. Des altérations de l’expression des défensines et une dérégulation des neutrophiles ont été étudiées dans le contexte d’affections inflammatoires et de phénotypes immunitaires associés aux infections, ce qui étaye l’intérêt de DEFA4 comme marqueur et nœud mécanistique dans la recherche sur l’immunité innée.
α-defensin 4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DEFA4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DEFA4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DEFA4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DEFA4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.