Les activateurs chimiques de Pegasus déclenchent leurs effets par le biais de diverses cascades de signalisation intracellulaire qui entraînent la modification post-traductionnelle et l'activation subséquente de la protéine. Par exemple, la forskoline augmente le niveau d'AMPc dans la cellule, ce qui active la protéine kinase A (PKA). La PKA activée peut directement phosphoryler le Pegasus, ce qui entraîne son activation. De même, le phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA) engage la protéine kinase C (PKC), une autre kinase qui peut phosphoryler Pegasus pour moduler son activité. L'ionomycine, en augmentant les concentrations intracellulaires de calcium, peut activer la kinase dépendante de la calmoduline (CaMK), qui est capable de phosphoryler et donc d'activer Pegasus. Le facteur de croissance épidermique (EGF) interagit avec son récepteur pour initier une cascade de signalisation qui active finalement la voie MAPK/ERK, connue pour contribuer à la phosphorylation et à l'activation de protéines similaires à Pegasus. L'insuline, par le biais de la voie de signalisation PI3K/Akt, peut également conduire à la phosphorylation de Pegasus. L'orthovanadate de sodium et la caliculine A agissent tous deux comme des inhibiteurs de phosphatase; en inhibant le processus de déphosphorylation, ils maintiennent le Pegasus dans un état phosphorylé et actif.
Toujours dans la gamme des activateurs chimiques, l'acide okadaïque, en inhibant spécifiquement la protéine phosphatase 2A (PP2A), maintient indirectement Pegasus dans son état phosphorylé, ce qui est associé à son activation. L'anisomycine active les protéines kinases activées par le stress (SAPK) qui peuvent phosphoryler Pegasus. L'isoprotérénol, un agoniste bêta-adrénergique, augmente les niveaux d'AMPc, activant la PKA, qui peut directement phosphoryler et activer Pegasus. Le chlorure de lithium, en inhibant la GSK-3, peut conduire à l'activation de protéines en aval qui pourraient inclure Pegasus. Enfin, le peroxyde d'hydrogène peut agir comme une molécule de signalisation dans les voies qui conduisent à l'activation de Pegasus par le biais des mécanismes de réponse au stress oxydatif. Chacune de ces substances chimiques, par leurs interactions spécifiques avec les voies de signalisation cellulaires, garantit l'activation fonctionnelle de Pegasus, ce qui lui permet de jouer le rôle qui lui est assigné dans l'environnement cellulaire.
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