A030007L17Rik Activateurs

Les activateurs A030007L17Rik courants comprennent, entre autres, la Forskoline CAS 66575-29-9, le PMA CAS 16561-29-8, l'Ionomycine CAS 56092-82-1, le Gallate de (-)-Epigallocatéchine CAS 989-51-5 et le Dichlorhydrate de Spectinomycine pentahydraté CAS 22189-32-8.

Les activateurs du gène A030007L17Rik représentent une classe de composés chimiques qui peuvent renforcer l'activité du gène A030007L17Rik. L'étape initiale de l'identification de ces activateurs implique un criblage à haut débit (HTS). Cette approche est essentielle pour passer au crible de grandes bibliothèques de produits chimiques afin d'identifier ceux qui ont l'effet désiré sur l'activité du gène. Plus précisément, dans ce contexte, un essai de gène rapporteur est mis en place dans lequel le promoteur A030007L17Rik contrôle l'expression d'un gène rapporteur détectable. Le gène rapporteur code généralement pour une protéine capable de générer un signal mesurable, tel que la fluorescence ou la luminescence, lors de l'activation. Lorsque divers composés chimiques sont introduits dans ce système, ceux qui peuvent augmenter l'activité du promoteur produiront un signal plus élevé. Les composés qui produisent une augmentation significative de l'activité du rapporteur sont identifiés comme des activateurs potentiels du gène A030007L17Rik. Ces molécules candidates font l'objet d'études de confirmation supplémentaires afin de valider leur potentiel d'activation du gène.

Une fois que le criblage à haut débit a permis d'identifier les composés prometteurs, l'étape suivante consiste à les valider à l'aide de la PCR quantitative (qPCR). Cette technique permet de quantifier avec précision les niveaux d'expression de l'ARNm du gène A030007L17Rik en présence des activateurs chimiques. Une augmentation des niveaux d'ARNm suggère que le produit chimique peut activer le gène au niveau transcriptionnel. Pour s'assurer que cette augmentation de l'ARNm se traduit par une augmentation correspondante de l'expression des protéines, une analyse par Western blot est ensuite réalisée. Il s'agit de résoudre les protéines cellulaires par électrophorèse sur gel, de les transférer sur une membrane, puis de les sonder avec des anticorps spécifiques de la protéine A030007L17Rik. Une augmentation visible des niveaux de protéines détectés, par rapport aux témoins non traités, confirmerait l'efficacité du composé dans l'activation du gène, indiquant une régulation positive du produit protéique. L'ensemble de ces méthodes fournit une confirmation solide du rôle du produit chimique en tant qu'activateur, établissant un lien direct entre l'activation du gène observée au niveau de l'ARNm et la production finale de la protéine.